国产食品安全检测仪器的发展现状
我国农产品、食品生产规模小、分散、复杂和供给渠道多、数量大、且人口与消费人群众多,法治和自律意识较弱,因而导致食品安全问题在从生产到消费的众多环节中多发。其改善途径就是加强法治监管,以及加强风险监测与分析、评估和交流,其技术手段和技术支撑就是检测技术和检测仪器。
农药残留检测
从2013年3月开始,由我国农业部与原卫生部联合发布的《食品中农药最大残留限量》标准开始实施。新标准规定了322种农药在10大类农产品中的2293个限量。
农药按用途分,主要包括杀虫、杀螨、杀菌和除草剂。其中应用广、用量大、毒性较强的是杀虫剂。其按化学成分划分主要包括有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、药酯类等。
主要使用的传统仪器包括:气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、毛细管区带电泳(CZE)、薄层色谱(TLC)等。我国多以GC和HPLC为基础,为准确定性(确证),应用GC-MS和LC-MS,甚至GCMS-MS。
随着生产、储、运、销逐渐规模化和法治化,我国将很快如同发达国家那样实现“源头快检筛查十实验室仪器分析检测确证”的模式,并向以GC-MS、LC- MS,甚至GC-MS-MS为核心,进行多残留同时定性(确证)和定量分析方向发展。
我国GC开发较早,技术性能不断提升,如东西电子、福立、上海仪电、天瑞、聚光、舜宇等企业,近几年推出的产品性能包括所配置的检测器(FPD、NPD、PFPD、ECD)已能满足单用GC检测农残的国标和行标的要求。
LC的引进和开发也不晚,但近几年产品性能才得以不断提升。东西电子在国内最早推出了GC-MS,并在农残分析上进行了不少推广应用。普析、天瑞、聚光、舜宇等也推出GC-MS和LC-MS,聚光还推出了GC-MS-MS。我国色质联用仪正在着力进行农残分析的应用开发和示范推广。
兽药、渔药残留检测
兽、渔药残留,加上工业色素类残留多达21类,且大多为大分子,结构和生化性质复杂。早期运用分光亮度仪(UV)、荧光计(FL)、CZE、GC、TLC、免疫分析法等。现代除少量应用GC和TLC、各种免疫分析法做快速筛查,已广泛使用高效、高分辨率的LC,以及能可靠确证分析的各种色质联用议(GC-MS、LC-MS、GC-MSMS和LC-MS-MS)。
兽药多残留检测近年来在国际上得到高度重视,例如我国于2006年发布了25项动物源性食品中118种兽药残留检测方法的国家标准,其中18项属于多残留分析方法,均应用LC-MS-MS检测。
对于农药检测中的高效/超高效LC和GC-MS、LC-MS,GC-MS-MS仪器,我国已有普源、东西电子、天瑞、聚光、舜宇、普析等企业推出,正处于应用开发和推广示范期,而LC-MS-MS尚缺成熟的国产产品。
添加剂、非法添加物检测
合法使用的添加剂含量多为常量级,部分微量级,所以检测、忡裁方法和仪器即用常量和部分微量级的检测仪器就够了。以其采用率排序,大致如下:滴定仪、水分计、烘箱与天平、酸度计、熔点仪、比色计、分光仪、UV、红外、旋光仪、纸层析、薄层色谱、离子选择电极;成分较复杂时用一般的LC和GC;涉及元素分析时用原子吸收和原子荧光。上述仪器我国生产企业多、水平与国外产品相近。
检测非法添加物的难点主要包括可用添加物多且未知,所以总是发生食品安全事件。需动用最快速、高通量、高分辨率、多目标物的筛查技术与仪器才能胜任,如超高效,高分辨率的GC、LC、GC-MS-MS、LC-MS-MS仪器才能胜任,其中MS采用杂交、重组、磁高分辨率等新技术,这方面正是我国国产仪器的大空白。
有毒有害元素及其价态检测
早先使用溶出伏安法和分光亮度仪,如今绝大多数为原子吸收光谱仪(AAS)可检测痕量级的水平。原子荧光光谱仪(AFS),可用于检测砷、铅、汞、锡、硒、锗、锑等元素,灵敏度高、检出限低、并可多元素同时检测,且价廉。电感耦合等离子发射光谱—质谱联用仪(ICP-MS),检出限可达ng/L级水平。
从食品安全角度看,仅检测有害元素含量是不够的,因同一种元素的价态(形态)不同,毒性差异很大,如甲基汞的毒性是无机汞的100倍,Cr(Ⅵ)的毒性比Cr(Ⅲ)高100倍,亚砷酸盐As(Ⅲ)的毒性比砷酸盐As(Ⅵ)高60倍。所以应进一步检测其价态(形态)。国外多采用HPLC-AAS、GC-AAS、HPLC-ICP-MS及CE-ICP-MS,后两种较完美,但价格很贵。近几年,我国成功开发并批量生产的LC-AFS联用仪,灵敏度、检出限均能满足农产品、食品安全的检测要求,且价廉,很适合我国国情。
我国生产AAS的基础较好,如瑞利、东西、普析、上光、上海仪电、天美、聚光、天瑞、高密等企业均生产中高档产品。AFS是我国具有自主知识产权的产品,并且还有AFS与LC联用的价态分析仪,典型的生产企业包括吉天、海光和上述生产AAS的众多厂家。近年来,天瑞推出ICP和ICP-Ms,正着力于应用开发和示范推广。
致病菌检验和细菌鉴定的方法与仪器
生物性污染是导致食品安全问题的主因之一,而食源性食品安全事件中,有31%以上是由致病菌引发的。
传统的细菌污染指标是菌落总数和大肠菌群。许多国家采用此指标。我国2010年度公布有关微生物检验的10个国家标准,也沿用上述指标,采用传统的检验方法、仪器:培养、菌落计数器、加染色、显微镜检,也提到检测试剂盒和全自动细菌鉴定系统。上述仪器除最后一项,我国国产产品很多,也很成熟,自动化水平不断提高,有些仪器还附加上镜检时的菌落形态判读等,其代表企业有先骇威锋、天迈生物等。
上述检验方法仪器尚可适应我国当前国情,但对于进出口检验和部(省)级质检中心,以及大型食品生产企业等,就显得太粗放。借鉴发达国家已广泛采用的方法和仪器,如传统法基础上的数值化、酶联荧光免疫、PCR与基因检测、SPR、生物芯片、MALDl-T0F-MS等。近几年博奥生物公司(生物芯片国家工程中心)推出了生物芯片微生物、致病菌检测系统;中科院电子所研发出SPR仪;毅新兴业与英国Sal公司及北京蛋白质组研究中心合作推出Clin-TOF微生物、致病菌检定和检测系统等产品。
生物毒素(真菌与真菌毒素)的检测
自然界生物毒素数百种,食品安全中危害颇大的是粮油及其制品、饲料、奶及其制品因储运不当,发霉等因素产生一些真菌代谢物,如黄曲霉毒素、伏马霉素、赭曲霉素、玉米赤霉烯酮等,毒性都很大。以黄曲霉毒素为例,其毒性很大,还有极强的致癌作用。黄曲霉菌毒素B1、B2、G1、G2的确证检测技术与仪器是HPLC-QQQMS,国产产品尚为空白。
中国农科院油料所开发的真菌毒素 HPLC激光诱导荧光确证技术,可运用国产HPLC配上激光诱导荧光检测器,完成检测任务。此外该研究所作为技术支撑单位,还与华夏科创等企业推出真菌毒素免疫亲和定量速测技术与仪器等,一些其他厂家也推出与上述仪器类似的产品。
食品品质与营养成分检测
人们对食品关心的是外观、口感、安全、营养,后二者是核心,而品质好坏,实际上是指人体发育、生长和生存必需的八大营养素:蛋白质、脂肪、碳水化合物、矿物质、维生素、生物活性成分、水和纤维素。这些营养素中除矿物质外都是常量级,所以用常规、经典的化学分析方法和仪器就能检测。
随着仪器分析技术的发展,催生出一系列与品质和营养成分对应的检测仪器,例如:
(1)蛋白质测定仪:凯氏定氮/蛋白质测定仪、燃烧法氮/蛋白质测定仪、亮度法等。燃烧法尚缺国产产品,凯氏定氯仪的国产企业很多,如盛晟、海能等。
(2)氨基酸分析仪:蛋白质摄入后,分解和合成为人体所需的各种氨基酸组成,其含量及配比是判别营养价值的重要指标。基于阳离子分离柱分离后茚三酮衍生亮度法的仪器(lEC),我国尚缺成熟产品。基于反相色谱分离、柱前衍生的液相色法(HPLC)和基于阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法的仪器(lC)均属常量分析,国产仪器应能达到。IC仪器的国产企业很多,如微通、盛瀚等企业。
(3)脂肪和脂肪酸测定仪:脂肪测定仪我国已有多家企业生产,如海能等,只是自动化程度尚不及国际名牌。近年,纽迈公司推出卜核磁共振油份和水分测定仪。现今发现不同脂类有不同营养价值,脂肪因其所含脂肪酸链的长短和饱和程度不同而有不同功能,而且人体不宜摄入过多脂肪,而又不能缺乏几种必需脂肪酸,所以脂肪酸分析仪有着新意义,其实就是分辨率较高的常量分析气相色谱仪。国产多家GC生产企业若能担当得起,仅需应用开发跟上。
(4)维生素测定仪:实际上是荧光亮度计,带有荧光检测器的液相色谱仪更适用,也属于常量分析,国产荧光亮度计和HPLC能够担当,生产企业很多。
(5)微量元素(人体所需矿物质)测定仪:众多原子吸收光谱仪生产企业产品均适用。
(6)糖分(糖度)检测仪:实际是旋光仪,上海仪电等企业产品完全能满足要求。
(7)近红外农产品品质分析仪:聚光一英贤等。
(8)农产品和食品快速检测仪:主要用于测定硝酸盐、甲醛、吊白块、二氧化硫、过氧化值等;吉大小天鹅为代表有众多企业生产此类仪器。
(9)稻米品质分析仪:浙江托普等。
(10)面粉品质分析系统:浙江托普等。
(11)纤维素测定仪:浙江托普、纤维仪器厂等。
转基因农产品检测
转基因农产品的检测,即检测农产品中是否有外源基因,实质上是检测启动子、终止子、标记基因片断、目的基因片断、外源基因转录产物的丰度等。就方法而言,分为基因水平检测(各种PCR定性、定量方法和基因芯片技术)和基因转录水平检测(酶联免疫吸附反应技术、蛋白芯片技术,以及Southen杂交Westen印迹法等)。
主要使用仪器按检测程序分3部分:
(1)用于DNA样品制备的仪器设备:试剂盒、离心机、振荡器等;
(2)基因扩增的仪器设备:PCR仪、混合液,保真DNA聚合酶等;
(3)分离、分析、检定的仪器设备:电泳系统、成像分析系统、核酸(蛋白)测定仪、酶标仪、洗板机、定量PCR仪等。
以前上述仪器主要依靠进口,如今国内许多企业能生产和提供,如天能、天美、三科、新芝、郎基、博日、六一、昊诺斯、君意、雷勃等企业。
适合当前国情的4种快速筛查技术与仪器
为实现我国食品安全监管、检测从源头开始,全面、及时地监控全国的食品安全,快速筛查技术与仪器在我国现阶段具有特殊意义。当今在国内已较广泛使用的快速筛查技术与仪器有以下4大类。
(1)基于经典的分子光谱法及纸层析法的速测技术与仪器
分子光谱法虽难于承担痕量的检测分析任务,但基于经典的分析化学,可开发出各种目标的化学分析方法。吉林大学小天鹅,华厦科创、博奥成功及总后研究所等,有针对性地整合和优化不同检测目标的多种试剂盒,推出了高精度、高稳定性、模块化的便携式仪器和与其配套的样品快速提取及富集技术,构成可以快速检测与食品安全密切相关的40多种参数(如硝酸盐、亚硝酸盐、甲醛、吊白块、味素、人造色素、无机砷、金属铅、劣质奶、“地沟油”、“泔水油”及菊脂类农药残留及部分兽药残留等)的多参数食品安全速测仪。
(2)免疫分析方法
包括放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫和胶体金标免疫等。具有高特异性、准确性、简便、快速等特点,可以检测兽药残留、致病菌、病毒、毒素及转基因产品。我国这几年发展很快,如勤邦、陆桥、天迈等,已能生产出性能与进口试剂盒相近且价格仅为进口试剂盒1/2~2/3的产品,得到食品企业,特别是出口食品企业欢迎。最近,勤邦又推出化学发光免疫分析技术和较简易的仪器及相关试剂盒,灵敏度比传统的酶联免疫技术提高1~2个级次。
(3)生物污染检测技术与仪器
传统的微生物检测方法很复杂,费工时,而现代微生物自动鉴定系统又非常昂贵,当今快速、简便检测生物污染的仪器是ATP荧光仪,即利用三磷酸腺苷与荧光素酶的发光反应,检测微生物和有机物污染程度。目前ATP仪,已应用于乳制品、糖饮料、肉类食品等行业中快速检测微生物、霉菌、细菌等污染。
(4)酶抑制法与仪器及其局限性
国内曾把酶抑制法和仪器首推为速测技术。近几年,已有十几种商品化仪器推出。该技术只能检测有机磷和氨基甲酸酯二类农药,且对同类不同种农药的抑制率差别很大,所以用统一的抑制率确定农药残留是否超标,必然会产生假阳性或假阴性的漏检,是当前“不得已而采用的速测法”。其仅适用于基层初检,起到警示作用,发现超标时,必须用标准方法复测、确证,阴性反应也应按比例抽样,用可靠的方法复测和确证。
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